Effect of resveratrol on the presence of ROS and GSH in domestic sheep skin fibroblasts

Abstract

El estrés oxidativo es generado por un desequilibrio entre la producción de especies reactivas de oxígeno (ERO) y la capacidad antioxidante del sistema celular. El antioxidante resveratrol neutraliza radicales libres induciendo la expresión de enzimas antioxidantes endógenas (glutatión peroxidasa, catalasa y superóxido dismutasa). A bajas concentraciones promueve la proliferación y diferenciación celular, a altas tiene efectos antiproliferativos arrestando el ciclo celular en fases específicas (G1, G2, M) e inhibiendo vías de señalización del crecimiento celular. Los fibroblastos son células del tejido conectivo, utilizados en clonación y estudios de reprogramación. El objetivo fue evaluar el efecto del resveratrol en la concentración celular, presencia de ERO y glutatión reducido (GSH) en fibroblastos de piel de ovino en distintos pasajes celulares. Se colectó 0.5 cm² de piel de oreja de ovino de rastro y se derivaron fibroblastos por explante en DMEM-F12 suplementado. Un grupo fue tratado con 0.5 µM de resveratrol (GE), otro sin tratamiento (GC), incubados a 38 °C, 5% de CO₂ hasta 90% de confluencia. Se repitió el tratamiento hasta el 9° pasaje. Se evaluó la concentración celular en cámara de Neubauer. Cubreobjetos fueron tratados con HCl 1M y poly-L-Lysine para tinción con Cell Tracker Blue (para GSH) y DCF (para ERO), analizados por inmunofluorescencia e ImageJ. La concentración celular no mostró diferencias significativas del pasaje 1 al 9, pero el GC presentó una disminución del pasaje 6 al 9, mientras que el GE tuvo un aumento significativo (p = 0.008). El GE tuvo mayores niveles de ERO (144.5) respecto a GSH (113.3), mientras que el GC mostró lo contrario, con diferencias significativas (p = 0.042). Se concluye que el resveratrol puede retrasar la senescencia replicativa y actuar como prooxidante moderado, promoviendo crecimiento celular sin superar la capacidad antioxidante. Se agradece al CONAHCyT (Actual SECIHTI) por el apoyo otorgado del convenio C-459/2024.